微生物学检查步骤

　临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物学检验。主要包括直接镜检、检测特异性抗原或病原体成分、进行分离培养和鉴定、体外药敏试验等。

　　（一）直接镜检

　　1.初步诊断；

　　2.指导进一步检出步骤和鉴定方法的选择；

　　3.评价标本的质量。

　　（二）快速诊断

　　快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测。

　　特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光免疫测定等。（免疫学检验技术）

　　核酸检测包括核酸探针杂交、PCR技术。（分子生物学检验技术）

　　其他快速检测法还有气-液相色谱法、化学发光、生物发光测定法和基因或蛋白微型阵列芯片技术等。

　　（三）直接药敏试验

　　鉴定结果快，但结果不明确，故分离出纯培养物后应再作体外药物敏感试验。

　　（四）常规检验

　　1.分离培养：

　　通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5％～10％CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。若原始培养为阴性，但据镜检结果和临床信息提示可能有病原菌存在，则应再采集大量标本，离心浓缩或溶解离心法处理，取沉淀接种营养丰富的需氧或厌氧培养基来培养。

　　对于存在正常菌群部位采集的标本，分离时应采用选择培养基以利于病原菌生长，也可加某些抗生素抑制污染菌的生长。对于某些感染标本中发现的细菌，如尿路感染的尿液中检出大肠埃希菌，可能是病原菌，也可能是污染菌或正常菌群，其临床意义的确定有赖于定量培养法。

　　2.鉴定：分离出的细菌一般应经过细菌形态、菌落特点、生化反应、血清学试验、动物接种等鉴定。目前尚有某些微量鉴定系统，其鉴定快速、简便，值得推广。如用于鉴定肠杆菌科的20E，鉴定非发酵菌的20NE及鉴定厌氧菌的20A等。

　　3.体外纯菌药物敏感性试验：常用方法包括抑菌试验、杀菌试验、医学。教育网整理联合药敏试验和检测细菌产生的抗生素灭活酶等。

　　（五）报告

　　①直接镜检要求2h报告，说明标本是否合格，发现微生物情况和特点；

　　②初步鉴定和直接药敏结果于24h或次晨报告，报告可能的病原菌和直接药敏结果；

　　③最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3天，还规定除血培养外，所有送检标本必须在24h内预报。

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